Obwodowe obwody otyłości FTO i brązowienie adipocytów u ludzi cd 9

Te wyniki sugerują, że wariant otyłości FTO działa poprzez przerwanie wiązania ARID5B w haplotypie ryzyka, prowadząc do utraty represji, zwiększenia aktywności wzmacniacza i wzrostu ekspresji IRX3 i IRX5 (Fig. S6M w Dodatku Uzupełniającym).
C-to-T Edycja wariantu ryzyka rs1421085 i wpływu na termogenezę
Ukierunkowana technologia edycji genomu z udziałem CRISPR-Cas929 umożliwia testowanie fenotypowego efektu zmiany przewidywanego nukleotydu przyczynowego rs1421085 w jego endogennym kontekście genomowym, w oderwaniu od innych genetycznych wariantów powiązanych z otyłością w tym samym haplotypie. Zastosowaliśmy CRISPR-Cas9 w pierwotnych preadipocytach z dwoma oddzielnymi przewodnikowymi RNA, jednym dla rs1421085 Ratowanie C-to-T przerwania motywu ARID5B u nosicieli ryzyka-allelu i jednym dla rozerwania rs1421085 T-to-C motywu ARID5B w nie-ryzyku. allele carriers.
Najpierw oceniliśmy wpływ edycji rs1421085 na poziomy ekspresji IRX3 i IRX5. Zaczynając od preadipocytów nośnika z allelem nie-gatunkowym, edycja T-to-C podwoiła ekspresję endogennego IRX3 i IRX5 do poziomów obserwowanych w nosicielach ryzyka-allelu; poczynając od edytowanych preadipocytów, C-to-T ponownej edycji z powrotem do allelu bez markera przywróconego niski poziom ekspresji (Figura 4C). Zaczynając od haplotypu ryzyka, edycja C-to-T zmniejszyła liczbę IRX3 i IRX5 do poziomów alleli bez markera, ale tylko w obecności ARID5B (Figura 4D); to ustalono, że zakłócenie represji ARID5B przez rs1421085 jest mechanistyczną podstawą zdarzeń regulacyjnych IRX3 i IRX5, które pośredniczą w oddziaływaniu locus FTO na otyłość.
Rycina 5. Ryc. 5. Ratowanie metabolicznych efektów termogenezy adipocytów poprzez edycję SNV rs1421085 w nośniku alleli ryzyka. Pacjent AA wykazuje zwiększoną średnią ekspresję IRX3 i IRX5 podczas wczesnego różnicowania adipocytów specyficznie dla allelu ryzyka; zwiększone poziomy ekspresji są uwalniane przez edycję genomu C-to-T. I słupki wskazują odchylenia standardowe. Panel B wykazuje zwiększoną ekspresję genów termogenicznych i mitochondrialnych na endogennej endogennej edycji nukleotydów C-to-T rs1421085 w komórkach progenitorowych adipocytów od pacjenta z allelem ryzyka. Panel C pokazuje zwiększony podstawowy i stymulowany izoproterenolem OCR na endogennym ratowaniu endogennego C-to-T pojedynczego nukleotydu rs1421085 w adipocytach z nośnika allelu ryzyka. Panel D pokazuje podsumowanie naszego mechanistycznego modelu powiązania locus FTO z otyłością, co implikuje przesunięcie rozwojowe sprzyjające przechowywaniu białych adipocytów przechowujących lipidy w stosunku do energetycznych beżowych adipocytów. W jego rdzeniu znajduje się wariant N-nukleotydowy T-to-C, rs1421085, który rozrywa konserwatywny motyw ARID5B i aktywuje mezenchymalny superenancer i jego cele (IRX3 i IRX5), prowadząc do zmniejszonego rozpraszania ciepła przez termogenezę mitochondrialną (proces, który jest regulowany przez UCP1, PGC1. i PRDM16) i do zwiększonego przechowywania lipidów w białych adipocytach.
Następnie ocenialiśmy rolę edycji rs1421085 podczas różnicowania białych i beżowych adipocytów, badając różnice w ekspresji między edited i unedited preadipocytes podczas różnicowania
[więcej w: procedury w gabinecie stomatologicznym, prady interferencyjne, wyszukiwarka skierowań na leczenie uzdrowiskowe ]

Powiązane tematy z artykułem: prady interferencyjne procedury w gabinecie stomatologicznym wyszukiwarka skierowań na leczenie uzdrowiskowe