Mutacja HABP2 w linii komórkowej wywołująca rodzinnego nieswoistego raka tarczycy.

Nasze wyniki sugerują, że HABP2 jest genem podatności na raka tarczycy pochodzenia komórek pęcherzykowych. Opis przypadku
Rysunek 1. Rysunek 1. Identyfikacja i ekspresja wariantu G534E HABP2.Panel A przedstawia rodowód rodowy, status w odniesieniu do nieswoistego raka tarczycy i genotypu HABP2 dla każdej mutacji heterozygotycznej (G534E). Kwadraty oznaczają męskich członków rodziny, okręgi żeńskich członków, zacienione symbole dotkniętych członków i tnie zmarłych członków; strzałka wskazuje na proband (pacjent II.2). Panel B pokazuje chromatogram sekwencji normalnego i zmutowanego genomu. Panel C pokazuje architekturę domeny białkowej HABP2 i zachowanie pozycji G534 w różnych gatunkach. EGF oznacza naskórkowy czynnik wzrostu, czynnik Hageman HAF (czynnik XII) i aktywator czynnika wzrostu hepatocytów HGFA. Panel D przedstawia ekspresję ilościowego informacyjnego RNA (mRNA) HABP2 z guzów i sąsiedniej zdrowej tkanki u dwóch chorych pacjentów w pokrewnym. Kontrola służy jako odniesienie. T bary oznaczają odchylenie standardowe. Strukturalne nałożenie domen trypsyny typu dzikiego (różowego) i mutanta G534E (niebiesko-zielone) trypsyny w panelu E pokazuje dezorientację pętli w wyniku polarnego łańcucha bocznego glutaminianu, który jest przedstawiony za pomocą kuli i -Modelowanie. Panele F i G pokazują powierzchnię dostępową miejsca katalitycznego domeny trypsyny odpowiednio w domenach mutantów typu dzikiego i G534E, z otoczeniem G534E (pomarańczowym). Panele od H do K wykazują reprezentatywne barwienie immunohistochemiczne dla HABP2 w próbce raka brodawkowatego tarczycy od chorego członka rodziny z wariantem G534E HABP2 (Panel H), prawidłową tkanką tarczycy tego samego członka rodziny (Panel I), próbką gruczolaka pęcherzykowego od członka rodziny (panel J) i próbki sporadycznego raka brodawkowatego tarczycy (Panel K). Barwienie jest pozytywne (brązowe) w cytoplazmie i jądrze próbek brodawkowego raka tarczycy.
Tabela 1. Tabela 1. Charakterystyka kliniczna, patologiczne ustalenia i leczenie u członków rodziny z nieswoistym rakiem tarczycy. Rodzinę z rodzinnym nieswoistym rakiem tarczycy skierowano do naszej placówki w celu oceny pacjentów dotkniętych i niedotkniętych chorobą w ramach protokołu klinicznego do badania kliniczne i genetyczne cechy choroby. Proband (Pacjent II.2) był najmłodszym z siedmiorga dzieci, z jednym dotkniętym bratem (Pacjentem II.4). Trzech członków tej rodziny (Pacjenci II.2, II.4 i III.1) zostało dotkniętych w momencie wstępnej oceny. Czterech innych członków rodziny, na podstawie badania ultrasonograficznego, wykryło nowotwory tarczycy (ryc. 1A i tabela 1); raka brodawkowatego tarczycy rozpoznano u trzech z czterech (pacjentów III.4, III.6 i III.7), a gruczolaka pęcherzykowego rozpoznano w jednym (pacjent III.8). Z ośmiu członków rodziny w czwartym pokoleniu (przedział wiekowy od 7 do 24 lat), którzy zostali poddani badaniu przesiewowemu, dwóch (pacjentów IV.1 i IV.5) miało małe guzki tarczycy (2 do 4 mm). Żaden z członków rodziny nie miał historii innych pierwotnych nowotworów, ale jeden członek (Pacjent III.7) miał dysplazję dysplastyczną usuniętą 12 lat przed prezentacją. Żadne inne łagodne guzy nie zostały wykryte w rodzinie.
Metody
Badanie to zostało zatwierdzone przez instytutowy organ kontrolny National Cancer Institute, National Institutes of Health
[więcej w: prady interferencyjne, skierowanie na zabiegi fizjoterapeutyczne, nfz kolejka do sanatorium ]

Mutacja HABP2 w linii komórkowej wywołująca rodzinnego nieswoistego raka tarczycy

Rodzinny nieswokarty rak tarczycy stanowi od 3 do 9% wszystkich przypadków raka tarczycy, ale geny podatności nie są znane. Tutaj przedstawiamy wariant linii zarodkowej HABP2 u siedmiu pacjentów dotkniętych chorobą z rodzinną nieswoistą rakiem tarczycy oraz u 4,7% z 423 pacjentów z rakiem tarczycy. Ten wariant był związany ze zwiększoną ekspresją białka HABP2 w próbkach nowotworu od dotkniętych członków rodziny, w porównaniu z normalną sąsiadującą tkanką tarczycową i próbkami ze sporadycznych nowotworów. Badania funkcjonalne wykazały, że HABP2 ma działanie hamujące rozwój guza, podczas gdy wariant G534E powoduje utratę funkcji.
Wprowadzenie
Rak tarczycy jest powszechny w Stanach Zjednoczonych, a ponad 62 000 przypadków jest prognozowanych w 2015 roku. Raki tarczycy pochodzenia komórek jajowych stanowią ponad 95% wszystkich przypadków raka tarczycy, a pozostałe nowotwory pochodzą z komórek parafolikularnych (rak rdzeniasty tarczycy ). Rodzinny nieswokarty rak tarczycy, który stanowi od 3 do 9% wszystkich przypadków raka tarczycy, ma autosomalny dominujący wzór dziedziczenia.1,2 Może być syndromiczny, występujący jako składnik jednego z rodzinnych zespołów nowotworowych (rodzinna gruczolakowata polipowatość Zespół Gardnera, choroba Cowdena, kompleks Carneya typu 1, zespół Wernera i zespół DICER1), dla których genów podatności są znane, lub może występować jako jedyny rak (niedotlenienie) .3 Niesymetryczny rodzinny nieswoisty rak tarczycy ponad 95% wszystkich przypadków rodzinnego nieswoistego raka tarczycy.2 Większość przypadków rodzinnego nieswoistego raka tarczycy to rak brodawkowaty tarczycy, który jest najczęstszym typem raka tarczycy. (więcej…)

Mutacja HABP2 w linii komórkowej wywołująca rodzinnego nieswoistego raka tarczycy..

Pacjenci wyrazili pisemną zgodę przed poddaniem ocenie i testom. Badania genetyczne
Przeprowadziliśmy wysokoprzepustowe sekwencjonowanie próbek DNA z krwi obwodowej z rodzinnego po wychwyceniu całego egzomu (szczegóły można znaleźć w Dodatkowym dodatku, dostępnym wraz z pełnym tekstem tego artykułu). Sekwencjonowanie Sangera zastosowano do walidacji wariantów zidentyfikowanych przez sekwencjonowanie całego egzomu u dotkniętych i nie dotkniętych chorobą członków rodziny.
Mutageneza i transfrakcje ukierunkowane na miejsce
Wytworzyliśmy rekombinowanego mutanta G534E przez ukierunkowaną mutagenezę komplementarnego DNA typu dzikiego i przeprowadzono transfekcje w celu ustalenia stabilnego raka tarczycy i linii komórkowych HEK293 (szczegóły, patrz Suplement Dodatek). Przeprowadziliśmy eksperymenty knockdown przy użyciu małego interferującego RNA (siRNA) kierującego do HABP2; Transfekcje siRNA przeprowadzono przy użyciu odczynnika do transfekcji Lipofectamine RNAiMAX (Life Technologies), jak opisano w dodatkowym dodatku.
Badania funkcjonalne
Przeprowadziliśmy testy klonogeniczne i migrację komórek przy użyciu ustalonych linii komórkowych typu dzikiego i ekspresjonujących G534E, z przejściowym knockdown HABP2 typu dzikiego. Do testów transformacji komórkowej wykorzystano mysią linię komórkową fibroblastów NIH-3T3. (więcej…)

Powiązane tematy z artykułem: lekarstwo na bielactwo nfz kolejka do sanatorium wemurafenib